(一)假如细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严厉无菌操作,翻开细胞培育瓶,吸出培育液,换 10ml新鲜培育液后持续培育。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培育瓶中,倒转放于37℃培育箱1-3分钟预热,然后又将培育瓶倒转大约10-30秒后,在倒置显微镜下调查细胞消化状况,若细胞大部分变圆,敏捷拿回操作台,轻敲几下培育瓶后加少数彻底培育基停止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加彻底培育基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培育瓶中。假如没有特别阐明,收到细胞后的**次传代一般是一传二。
注:1、调查细胞**在低倍镜(4或5X物镜)下进行,不然不能精确判别细胞的传代密度。
2、瓶中运送培育基不能重复再用,请换用加双抗的新培育基,细胞冻存后,培育基中可不加任何抗生素。
4、收到细胞后,若发现培育瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请及时与咱们联络。